湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，以高温高压水蒸气为介质，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，最终导致微生物的死亡，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是药物制剂生产过程中最常用的灭菌方法。
本期为您介绍湿热灭菌常见的5种方法。每种方法对压力、温度、时间分别有怎样的要求？又适用于何应用？消毒灭菌效果如何？
湿热灭菌的原理是使微生物的蛋白质及核酸变形导致其死亡。这种变形首先是分子中的氢键分裂，当氢键断裂时，蛋白质及核酸内部结构被破坏，进而丧失了原有功能。蛋白质及核酸的这种变形可以是可逆的，也可以是不可逆的。
虽然无所谓动能行结构被破坏，若氢键破裂的数量未达到微生物死亡的临界值，则其分子很可能恢复到它原有的形式，微生物就没有被杀死。为有效地使蛋白质变形，如采用高压蒸汽灭菌时，就需要水蒸气有足够的温度和持续时间，这对灭菌效果十分重要。
高温饱和水蒸气可迅速使蛋白质变形，在规定操作条件下，蛋白质发生变形的过程即微生物死亡的过程，是可预见和重复的。
影响湿热灭菌的主要因素有：
微生物的种类与数量
蒸汽的性质
药品性质
灭菌时间等
亦称低温消毒法。目前主要用于牛乳消毒。国际上通用的巴氏消毒法主要有两种：
一种是将牛奶加热到62℃-65℃，保持30分钟。采用这一方法，可杀死牛奶中各种生长型致病菌，灭菌效率可达97.3%-99.9%，经消毒后残留的只是部分嗜热菌及耐热性菌以及芽孢等；但这些细菌占多数的是乳酸菌，乳酸菌不但对人无害反而有益健康。
第二种方法将牛奶加热到75-90℃，保温15-16秒，其杀菌时间更短，工作效率更高。但杀菌的基本原则是，能将病原菌杀死即可，温度太高反而会有较多的营养损失。
常用于食具、刀剪、注射器的消毒，方法是煮沸100℃（1个大气压状态下），5min中可杀死细菌繁殖体，如于水中加入2%碳酸钠，则可提高其沸点至105℃，可杀死芽胞。
是指在常压条件下，采用100摄氏度流通蒸气加热杀灭微生物的方法，灭菌时间通常为30-60分钟。该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌，但不能保证杀灭所有芽孢，是非可靠的灭菌方法。
利用反复多次的流通蒸汽加热，杀灭所有微生物，包括芽胞。方法同流通蒸汽灭菌法，但要重复3次以上，每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃孵箱过夜，目的是使芽胞发育成繁殖体。若被灭菌物不耐100℃高温，可将温度降至75℃～80℃，加热延长为30～60分钟，并增加次数。适用于不耐高热的含糖或牛奶的培养基。
103.4千帕蒸汽压温度达121.3℃，维持15-20分钟，可杀灭所有细菌芽孢和繁殖体。
湿热灭菌法可在较低的温度下达到与干热法相同的灭菌效果，因为：① 湿热中蛋白吸收水份，更易凝固变性；② 水分子的穿透力比空气大，更易均匀传递热能；③ 蒸汽有潜热存在，每1克水由气态变成液态可释放出529卡热能，可迅速提高物体的温度。高压湿热灭菌法一般采用121℃，灭菌20-30min，如果是产孢子的微生物则应采用灭菌后适宜温度下培养几小时，再灭菌一次，以用于杀死刚刚萌发的孢子。